J Clin Invest：阐述USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

胶质母肝细胞瘤（GBM）是最相似和破坏连续性的人脑恶连续性，其特征在于广泛应用的内异质连续性。尽管最近在多模式化疗方面取得了进展，但GBM极低血压的结果仍然令人沮丧。GBM享有一个肝细胞亚群，统称GBM生殖肝细胞（GSCs），带有自我新增活连续性和多向分化充份以及起始能力。因此，迫切需要探索针对GSC的新化疗策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和外源醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人胚胎的各种荷尔蒙过程。愈发多的结论说明，ALDH1A3在前列腺癌生殖肝细胞（CSCs）中的表现出极低活连续性，并影响这些肝细胞内的各种生物学特征。在GBM中的，已辨认出ALDH1A3作为依靠在在充质（MES）GSC的自我新增和致瘤连续性的关键因素水分子。然而，MES GSCs中的ALDH1A3失调的的系统仍然是神秘的。2019年4翌年8日，南京医科大学第一理学院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上撰写题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，辨认出USP9X是一种显然的DUB，可调节ALDH1A3多泛素化和稳定化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs石英砂的关键因素水分子，是MES GSCs自我新增和致瘤连续性所必需的。同时还风险评估了USP9X选择连续性对极低血压来源的MES GSC异种Dreamcast基本概念的潜在治果。为了确定ALDH1A3抗原是否被泛素 - 特异连续性系统（UPS）翻译后控制，研究成果医护人员首先适用放线菌酮（CHX）阻断胺基酸从头合成并HEK293T肝细胞和正常人圆锥胶质肝细胞（NHAs）中的的ALDH1A3胺基酸水平。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8每隔内逐渐降解并大部分监测不到。此外，用特异连续性选择连续性剂MG-132处理肝细胞导致ALDH1A3抗原水平引人注意增大。这些数据说明ALDH1A3通过UPS降解。接下来，研究成果医护人员促使鉴定负责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并适用靶向HEK293T肝细胞中的的98DUB的siGENOMERTF创刊号完成RNAi审核。该研究成果初始审核鉴定了与ALDH1A3隐含就其的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293肝细胞中的的ALDH1A3共隐含时，辨认出只有USP9X尽可能与内源连续性ALDH1A3直接相互作用，从而暗示USP9X是控制ALDH1A3准确度的引人注意候选物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或裂解失活的特异连续性C1566A USP9X（在裂解残基的一个关键因素半胱氨酸中的空投点突变）转染到HEK293T肝细胞中的。 WT USP9X而非C1566A特异连续性的隐含以浓度依赖连续性形式增大ALDH1A3抗原水平，说明USP9X以也就是说其DUB活连续性的形式调节ALDH1A3。胶质母肝细胞瘤（GBM）生殖肝细胞（GSC）的在在充质（MES）亚型代表癌肝细胞亚群，其因其极低度侵袭连续性和对值得注意化疗法的施用而闻名。最近已明确指出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为依靠GSC的MES特征的关键因素决定因素。然而，支持异常ALDH1A3隐含的的系统仍然难以捉摸。在该研究成果中的，研究成果医护人员辨认出泛素特异连续性抗原酶9X（USP9X）是MES GSC中的ALDH1A3的显然去泛素化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，异构化并稳定化。此外，研究成果结果说明FACS分选的USP9Xhi肝细胞石英砂带有极低ALDH1A3活连续性和有效地致瘤能力的MES GSC。USP9X的消耗引人注意下调ALDH1A3，导致MES GSC的自我新增和致瘤能力的丧失，这可以通过ALDH1A3的异位隐含取得非常大程度的力挽狂澜。此外，研究成果医护人员还证明USP9X选择连续性剂WP1130诱发ALDH1A3降解并且在MES GSC衍生的原位异种Dreamcast基本概念中的显示出引人注意的化疗解热。另外，USP9X与原发连续性人GBM样品中的的ALDH1A3隐含浓烈就其，并且对于带有MES亚组的极低血压带有预后价值。总的来说，研究成果结果揭示了USP9X作为ALDH1A3抗原稳定化的关键因素去泛素化酶和GSC定向化疗的潜在抗癌药物。完整引自：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019